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PCR實(shí)驗(yàn)室的一些常識(shí)，PCR實(shí)驗(yàn)室廠家為你解惑
發(fā)布時(shí)間：
2022-05-16
PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。這種方法又稱為體外引物導(dǎo)向的特定DNA序列的酶促擴(kuò)增，可以特異性地將極微量的目標(biāo)DNA擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一大創(chuàng)新。
PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。這種方法又稱為體外引物導(dǎo)向的特定DNA序列的酶促擴(kuò)增，可以特異性地將微量的目標(biāo)DNA擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一大創(chuàng)新。
PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為PCR技術(shù)因其特異性強(qiáng)、靈敏度高、對(duì)待測(cè)樣品要求低、方便快捷而被廣泛應(yīng)用于各種臨床診斷。目前，國(guó)內(nèi)二級(jí)以上醫(yī)院正在開(kāi)展PCR技術(shù)的各種臨床應(yīng)用。PCR實(shí)驗(yàn)室是承載PCR技術(shù)應(yīng)用的設(shè)施，合理的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)可以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。因此，PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和建設(shè)越來(lái)越受到建設(shè)單位的重視。
PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為PCR實(shí)驗(yàn)室的核心問(wèn)題是避免污染，那么如何從試劑制備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)保證生物安全呢？平面布局和通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)要點(diǎn)是什么？需要注意哪些問(wèn)題？
PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為實(shí)驗(yàn)室布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等。都是圍繞著避免污染這個(gè)問(wèn)題來(lái)設(shè)計(jì)的。任何醫(yī)院在建設(shè)PCR實(shí)驗(yàn)室時(shí)，都需要提前考慮各種因素，以保證標(biāo)本各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)室的生物安全。
1.施工要求。PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為PCR實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)需要設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)的“四區(qū)”:試劑制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增檢測(cè)區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)。每個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)都有一個(gè)緩沖區(qū)，每個(gè)區(qū)域都由氣壓調(diào)節(jié)，從而在整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保護(hù)試劑和樣品不受氣溶膠污染，減少擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人和環(huán)境的污染。
2.人員要求。PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室，需要經(jīng)過(guò)從基礎(chǔ)理論、實(shí)驗(yàn)原理、標(biāo)準(zhǔn)操作、質(zhì)量保證到注意事項(xiàng)的規(guī)范化培訓(xùn)，取得PCR執(zhí)照。
3.檢測(cè)風(fēng)險(xiǎn)。在檢測(cè)過(guò)程中，樣品的開(kāi)啟、核酸提取的搖動(dòng)和離心都可能產(chǎn)生氣溶膠，有感染的風(fēng)險(xiǎn)。
4.保護(hù)要求。按照生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)要求進(jìn)入。
PCR實(shí)驗(yàn)室的污染源有哪些？PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為：
1.樣本間交叉感染：采集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)，導(dǎo)致溢出；移液不同樣品時(shí)，忘記更換槍頭或不使用帶濾芯的槍頭；移液器等實(shí)驗(yàn)室儀器和耗材未及時(shí)消毒滅菌；當(dāng)不同樣品同時(shí)打開(kāi)，或劇烈搖動(dòng)樣品并反復(fù)吹吸時(shí)，氣溶膠形成并擴(kuò)散，發(fā)生交叉污染。
2.實(shí)驗(yàn)試劑污染：PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為主要是PCR組分試劑加樣過(guò)程中，核酸模板或陽(yáng)性質(zhì)控品污染了移液管、容器、陰性質(zhì)控品等試劑。在加樣過(guò)程中，由于PCR試劑對(duì)溫度非常敏感，需要用冰浴將PCR試劑和PCR板/管保持在0，但這一過(guò)程也充滿了污染風(fēng)險(xiǎn)。
3.擴(kuò)增產(chǎn)物的污染：PCR實(shí)驗(yàn)室廠家認(rèn)為擴(kuò)增后大量拷貝產(chǎn)物的泄漏或PCR反應(yīng)管的意外打開(kāi)是PCR反應(yīng)中十分重要也是很常見(jiàn)的污染問(wèn)題。由于PCR產(chǎn)物的拷貝數(shù)很大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)幾個(gè)拷貝的極限，所以少量的PCR產(chǎn)物就可能造成假陽(yáng)性。
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